Ugrás a tartalomhoz

Fermentációs biotechnológia

Dr. Kutasi József (2007)

Glia Kft.

5. fejezet - Galéria

5. fejezet - Galéria

Félautomata autokláv nyomástűrő szigetelt tetőnyílása.

A kláv erős a túlnyomást elviselő fedéllel és leszorító záró szerkezettel rendelkezik.

Ipari gőzköpenyes autoklávok sora.

A gyógyszergyári tenyésztés folyamatosságát a nagyteljesítményű átadó autoklávok biztosítják.

Certokláv szenzorai

Az európai certokláv nyomásmérővel, hőmérővel biztonsági szeleppel( a kép előterében), nyomáskiengedő szeleppel (nagy szelep), gőzkiengedővel(fekete kerek) rendelkezik.

Micrococcus roseus piros telepei.

A Micrococcus roseus piros telepei között nagy fehér Bacillus és kisebb sárga pseudomonas telepek láthatók az agarlemezen.

5 köbméteres fermentor turbinakeverője és bemászó létrája.

A fermentorban létrán lehet a keverőlapáthoz vagy a fermentor fenékhez lejutni.

100 literes fermentor turbina keverője

100 literes fermentor rozsdamentes acél turbina keverőlapátjai, jól látszik a vízkőlerakódás.

5 literes fermentorfej lecsomagolva

A sterilezéshez fermentor mindent lezárunk és lecsomagolunk, kivéve a kimenő levegő csonkját. Ezt bár lecsomagoljuk nem zárjuk, hogy a sterilezésnél fellépő nagy nyomáskülönbség össze ne roppantsa a fermentorüveget.

1 köbméteres fermentor közelről.

Jól látszik a fermentor közepéből kiálló keverőtengely, amelynek szimeringgyűrűs, vízzáras tömítése,kék gyűrű) biztosítja a steril kapcsolatot a fermentorfejjel.

Kutató mikroszkóp, fáziskontraszt és fluorescens(hátul) feltéttel objektívekkel, okulárral.

A tárgyasztal alatt helyezkedik el a fáziskontraszt feltét, míg a fluorescens gerjesztő higanygőz lámpa hátul hűtőlamellák között található.

Fáziskontraszt mikroszkóp

Fluorescens feltét nélküli kutató mikroszkóp.

Gélelektroforézis kád (Gélelfo) és elektromos tápegység.

A gélelektroforézis alapelve, hogy a töltéssel rendelkező molekulák elektromos térben, össztöltésüknek megfelelően, az ellentétes töltésű elektróda felé vándorolnak. A vándorlás sebessége (v) függ a molekula töltésétől (z), tömegétől és alakjától (f) továbbá az elektromos térerőtől (E):V=(E*z)/f

Eppendorf centrifuga (mikroliterek fugálásához).

A kis térfogatok 1-1,500 mikroliter ülepítését eppendorf műanyag csövekben centrifugálják erre alkalmas készülékben.

Laboratóriumi automatizált centrifuga nyitva.

A modern digitális centrifuga viszonylag kis méretű, mégis hűtött viszonyok között 250 ml térfogatot 10000 r.p.m. fordulaton centrifugálhatunk, a nyitott ajtó mellett egy centrifugapohár látható.

Agarferde oltatlanul.

Az oltatlan agrferde felülete sima, nem látszik rajta semmi.

pH mérő kijelzett értéke, adott hőmérsékleten.

A képen egy 6,44 pH-jú vegetatív fázisú Bacillus subtilis tenyészetet mérnek. Az ilyen, még szaporodő fázisú tenyészet pH-ja, amíg elegendő szénforrás áll rendelkezésre, a termelődő szerves savak hatására folyamatosan csökken, majd annak elfogyásával a pH a lúgos tartomány felé mozdul el.

pH szonda üvegelektróddal, védőházban.

A pH mérők szenzora egy üvegelektród, melyen egy diafragma biztosítja az ionok átjutását az elektródhoz.

Baktériumtenyészetek rázógépen.

Bradyrhizóbium japonicum a szója gyökérbaktériumának tenyészetei.350-400 r.p.m. fordulaton kell gondoskodni a sejtek levegőellátásáról.

Szubmerz baktériumtenyészetek.

Többféle baktériumkultúra gézdugós nátronpapiros, steril csomagolással.

Szubmerz gombatenyészet.

A 48 órás Humicola insolens celluláz termelő gombatenyészet fonalai részben kiültek a lombik falára, de jól láthatók a folyadékban lebegő gombapelyhek is.

Sterilen csomagolt és sterilezett szubmerz tenyészetek oltás előtt.

A gézdugóval és nátronpapírral csomagolt steril lombikok gomatenyészetek ferdéivel lesznek oltva (jobbra).

GLP helyiség

GLP helyiség

Steril Szoba.

Sokszor steril box helyett egy egész szobát steril levegővel látnak el. A szobában fermentorok oltására is sor kerülhetett. Gyógyszerkutató Intézet.

Steril box levegőszűrő lamellái.

A lamellák a 0.5 mikréternél nagyobb részecskéket nem engedik a boxba.

Steril box steril felső szűrő lamellákkal(vertikális box).

Steril box steril felső szűrő lamellákkal(vertikális box).

Steril szoba márvány asztallal.

Steril szoba márvány asztallal.

Vízköpenyes hengeres régi típusú autokláv.

A régi típusokon jól látszódnak az óriási hőálló csavarok, amelyek a fedél megfelelő lezárását biztosították. Az előtérben a a köpeny vízfeltöltésére szolgáló tölcsér látható.

Félautomata autokláv nyomásmérői és szabályozó karja.

A nyomásmérő és hőmérő a készülékbe beépítve található (a köpenynek külön nyomásmérővel). A kapcsolószerkezet félautomata, működését az operátor biztosítja.

Automata autokláv nyitása.

A nyomástűrő még forró fedél leemelése mindig embert próbáló feladat.Fermentia Kft engedélyével.

Amerikai típusú certokláv

Az amerikai típusú certokláv csavarokkal szorítja le a fedelet. A fedél két oldalán a nyomásmérő és a gőzkiengedő szelep látható.

A mikrobiológiai táptalajkonyha eszközei

A mikrobiológiai táptalajkonyha főző edényei. A táptalajok előfőzésére szolgálnak.

A mikrobiológiai táptalajkonyha szárító egysége

A megtisztított tenyésztő üvegedényeket gőzzel fűtött polcos szárítón utószárítják.A polctartó csövekben kering a gőz, amely a megfelelő hőt biztosítja.

Táptalaj konyha ipari mosogató egysége.

A helyes rozsdamentes mosogató az egész mikrobiológiai és fermentációs üzemet képes ellátni tiszta és steril edényekkel. Gyógyszerkutató Intézet.

Üzemi szilárd felületi tenyészetek kamrában.

A tenyésztő kamrában egymásra pakolt ládák közé steril gőzt vezetnek, a megfelelő nedvesítés eléréséhez. A felületi gombatenyésztést 95-98 % páratartalmon lehet csak biztonsággal végezni.

Üzemi tálcás szilárd felületi tenyészetek.

A tálca szélén(szürke bevonat) láthatóan kinőtt a penészgomba, míg a korpán még nem!

Liócső a fagyasztva szárítón.

A liofilizátumból ampullába zárva szivattyúzzák ki a levegőt. Az ampullában lévő vákuum erősen redukálja a kíméletesen megszárított tenyészet raktározás (tárolás) alatti hőpusztulását.

Automata pipetták

Az automata pipettákkal 0,1- 5000 mikroliter folyadék térfogatot egyaránt pontosan kimérhetünk, sterilizált műanyag pipettahegyekkel sterilen is dolgozhatunk. Sok esetben maguk a pipetták is autoklávozhatók. Régen a gyártó cégről finnpipetának nevezték őket, ma már igen sokféle cég gyárt, forgalmaz és használatuk általánosan elterjedt (Gibson, Socorex, Jencons).

Vatta (pelenka) és nátronpapír csomagolású steril 1 literes erlenmeyer lombikok rázatott tenyésztéshez

A mikroorganizmus kultúrákat 500, 1000, 3000 és 5000 ml -es erlenmeyer lombikokban tenyésztik. A tenyészeteket sterilezni kell steril zárással, úgy, hogy megfelelő levegő is jusson a lombikokba. A steril levegőzésren képes zárást papírvatta-gézdugóval vagy régi típusú pelenkával oldják meg, nátronpapír fedéssel.

Malátakivonat (Malt extract) Oxoid és Difco tápanyagok.

A laboratóriumi munkában a táptalaj készítéséhez legtöbbször tiszta, ellenőrzött baktérium, gomba ill. emlőssejt táptalajokat, vegyszereket használnak. A világon jó néhány gyártó van, amely ilyen táptalajok előállítására szakosodott, pl.: Difco, BBL, Oxoid stb.. Ezekből az anyagokból elsősorban u.n. inokulum tenyészetek táplevesei és tápagarai készülnek. Az inokulumok a technológiai folyamat első lépcsőinek tekinthetők, ahol speciális ideális összetételű tápanyagok biztosítják a maximális szaporodást és termelést. A képen a speciális gombák vagy baktériumok tenyésztésére alkalmas malátakivonat látható.

Baktériumtelep számlálás agarlemezen.

A mikrobiológiai aszisztens baktériumtelepeket számlál agarlemezeken. (Tanay Károlyné engedélyével).

Megszámolt Micrococcus baktériumtelepek (piros) agarlemezen, fertőzéssel (Bacillus, fehér nagy telep).

A baktériumtelepeket a petricsésze alján filctollal megjelölve számláljuk.

Talajbaktériumok vegyes tenyészete egy agarlemezre kiszélesztve

Talajbaktériumok vegyes tenyészete egy agarlemezre kiszélesztve

Telepek

Az átlátszó Pseudomonas telepek (teaszínű) között kisebb piros Micrococcus és drapp színű Azospirillum baktériumtelepk találhatók. Talajizolátum.

Bacillus circulans telepek

Döntően Bacillus circulans (nagy fehér)telepek, kisebb piros Micrococus és kisebb fehér Azotobacter telepekkel. Talajizolátum.

Pigmenttermelő Pseudomonas telepek agarlemezen.

Pigmenttermelő Pseudomonas telepek agarlemezen.

A fermentor belsejében

A fermentor belsejében a forgatott tengelyen kettő turbina keverőlapát biztosítja a megfelelő levegőellátást a tenyészeteknek.

Régi típusú 5 köbméteres ipari fermentorüzem.

A köbméteres fermentorok emeleten átnyúló felépítésűek, a fermentor fejet megközelíteni csak az emeleten lehet. Jól láthatók a keverőtengely motorjai és a régi típusú fermentortest szigetelés.

Régi típusú 5 köbméteres fermentor feje, bebújó és adagoló nyílással, csövezéssel.

A fermentorfejen helyezkedik el a bebújónyílás, ahol a tápanyagokat beadagolják, illetve ahol szükség esetén a fermentorkezelő bemászik javítás esetén.

5 köbméteres fermentor bebújónyílása közelről.

A nyíláson épp, hogy befér egy ember. Régi fermentoroknál a gyakori meghibásodás miatt erre gyakran szükség volt.

100 literes fermentor steril levegoadagoló lantja(keverő nélkül).

100 literes fermentor steril levegoadagoló lantja(keverő nélkül).

5 literes fermentor táptalajjal feltöltve csupaszon.

A BIOSTAT B-DCU egy sokoldalú, teljesen integrált asztali fermentor rendszer mikrobiológiai és sejt-tenyésztési alkalmazásokhoz. Moduláris szerkezete révén egy-, két-, három vagy négyedényes rendszer-ként is összeállítható.A csupasz fermentor még nincs sterilre csomagolva, ezért jól látszik a fej és a hűtő és adagaló csövezés.

100 literes fermentorfej adagolócsővel, kémlelő nyílással.

100 literes fermentorfej adagolócsővel, kémlelő nyílással.

100 literes fermentor műszerei.

100 literes fermentor műszerei.

100 literes fermentor fejmotorral, nyomásmérővel, gőzcsővezetékkel.

A fermentortengely motorja és a nyomásmérő jól látszik. A fekete szigetelt csöveken gőz áramlik a fermentorba, sterilezésnél (direkt gőz fűtés).

10 literes fermentorfej nyomásmérővel, hőmérővel, adagolónyílásokkal és oltócsővel.

A fermentorfej sokféle adagoló és szonda bemenetet tartalmaz a megfelelő nyomásmérő és hőmérő mellett.

1 köbméteres fermentorfej adagoló és gőzcsővezetékkel, nyomásmérővel, keverő motorral.

A modern 1 köbméteres fermentor feje bonyolult csövezéssel és szenzorparkkal rendelkezik.

Sötétkamra a gél ultraibolya átvilágítására ( a DNS etídium-bromiddal a UV fényben floureszkál)

A genetikus (Rév Ambrus biológus) DNS-t vizsgál. A készülék tetején a nagy érzékenységű CCD kamera a kamra lelke.

Félüzemi több liter fermentlé lefugálására alkalmas hűthető max. 3000 r.p.m.fordulatszámra képes centrifuga

A centrifugálás során 3000-10000 r.p.m.(perc/fordulat) fordulaton szükséges a tenyészeteket ülepíteni és így az organizmusok elválaszthatók a tenyészlevüktől.

Laboratóriumi automatizált centrifuga szögrotorja, centrifuga pohárral.

A szögrotor nagyobb fordulatszámra, de csak kisebb térfogatra képes.Itt a pohár nem áll a centrifugális erő irányába, így a fugált anyagok ferdén tapadnak le a pohár aljára.

Bacillus thuringiensis.

Vastag vegetatív pálcák.

Lióampulla liofilizáló egységen

A közelképen jól kivehető az ampulla tartalma: kis csőben foglal helyet a tenyészet, amely a liofilizálón a gumicsonkra csatlakoztatva éppen vákuum alatt van.

Vákuum centrifuga

A liofilizálás első lépése, hogy a nagy víztartalmú tenyészetet, megfelelő védőanyag mellett alacsony hőmérsékleten, centrifugálás közben vákuum alatt tartva(vákuum centrifugában) a víztartalom nagy részétől (a sejtekben nem kötött víztől) megszabadítják.